土壤过氧化氢酶（Solid-Catalase，S-CAT）试剂盒说明书（微量法）

注意：正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定

产品内容：

试剂一：液体×1 瓶，4℃保存；临用前加入29.7mL 蒸馏水充分溶解后待用；用不完的试剂4℃ 保存；

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入1mL 蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；

试剂三：液体×1 瓶，4℃保存。

产品说明：

S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类，在H2O2 清除系统中具有重要作用。

H2O2 在240nm 下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT 活性的高低。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）和蒸馏水

操作步骤：

一、 样品处理：

新鲜土样自然风干或 37  度烘箱风干，过 30~50 目筛。

二、 测定步骤：

1、 分光光度计或酶标仪预热30min 以上，调节波长至240nm，蒸馏水调零。

2、 加样表

三、 S-CAT 活性计算：

A、用微量石英比色皿测定的计算公式如下

单位的定义：每天每g 风干土样催化1μmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

计算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷（ε×d）

×106]÷W÷T=16.5×（A 无土管-A 测定管+A 无基质管）

V 反总：反应体系总体积，3×10-4 L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm； T：反应时间，20 min=1/72d； W：样本质量，0.03g。

B、用96 孔板测定的计算公式如下

单位的定义：每天每g 风干土样催化1μmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

计算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷（ε×d）

×106]÷W÷T=33×（A 无土管－A 测定管+A 无基质管）

V 反总：反应体系总体积，3×10-4 L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×104 L / mol /cm；d：96

孔板光径，0.5cm； T：反应时间，20 min=1/72d； W：样品质量，0.03g