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产品名称:土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:YX-C-B935,YX-W-B935

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-B935

土壤β-葡萄糖苷酶(S-β - GC)测试盒

可见分光光度法

50/24

530

YX-W-B935

土壤β-葡萄糖苷酶(S-β - GC)测试盒

微量法

100/48

1000

土壤 β -葡萄糖苷酶(Solid-β -Glucosidase,S-β -GC) 试剂盒说明书(微量法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-β -GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理:

S-β -GC 能够催化对-硝基苯-β -D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有特征光吸收。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯 5mL×1 4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 10mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂三:液体 20mL×1 4℃保存; 试剂四:液体 15mL×1 4℃保存;

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 400nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.02

0.02

试剂一(μ L)

10

10

 

室温振荡混匀 15min

90℃振荡混匀 15min

试剂二(μ L)

130

 

蒸馏水

 

130

试剂三(μ L)

160

160

混匀, 37℃振荡反应 1h 90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却, 10000g 25℃离心 10min,取上清液( EP 管或 96 孔板中加入下列试剂

上清液(μ L)

70

70

试剂四(μ L)

130

130

充分混匀,室温静置 2min 后, 400nm 处测定吸光值A,计算Δ A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

S-β-GC 活力计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027;x 为标准品浓度(μ  mol/L)为吸光值。

单位的定义:每天每g 土样中产生 1 μ mol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β -GC  μ mol/d/g  ) = (Δ A+0.0027) ÷0.0032×V  ÷W÷T

=112.5×(Δ A+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0016x -0.0027;x 为标准品浓度(μ  mol/L)为吸光值。

单位的定义:每天每g 土样中产生 1 μ mol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β -GC  μ mol/d/g  ) = (Δ A+0.0027) ÷0.0016×V  ÷W÷T

=225×(Δ A+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。



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