产品名称:土壤α-葡萄糖苷酶(S-α - GC)测试盒
产品规格:24样/48样
产品货号:YX-C-B931,YX-C-B931
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-B931 |
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α - GC)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
550 |
YX-W-B931 |
土壤α-葡萄糖苷酶(S-α - GC)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1000 |
测定意义:
S-α -GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-α -GC 能够催化对-硝基苯-α -D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有特征光吸收。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 10mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存; 试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 400nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.02 |
0.02 |
试剂一(μ L) |
10 |
10 |
|
室温振荡混匀 15min |
90℃振荡混匀 15min |
试剂二(μ L) |
130 |
|
蒸馏水 |
|
130 |
试剂三(μ L) |
160 |
160 |
混匀, 37℃振荡反应 1h 后,90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却, 10000g 25℃离心 10min,取上清液(在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂)
上清液(μ L) |
70 |
70 |
试剂四(μ L) |
130 |
130 |
充分混匀,室温静置 2min 后, 400nm 处测定吸光值 A,计算 Δ A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC 活力计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027;x 为标准品浓度(μ mol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每g 土样中产生 1 μ mol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S- α -GC 活 力 ( μ mol/d/g 土 样 ) = (Δ A+0.0027) ÷0.0032×V 反 总 ÷W÷T
=112.5×(Δ A+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0016x -0.0027;x 为标准品浓度(μ mol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每g 土样中产生 1 μ mol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S- α -GC 活力( μ mol/d /g 土样)= (Δ A+0.0027) ÷0.0016×V 反总 ÷W÷T
=225×(Δ A+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。
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