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产品名称:土壤酸性转化酶(S-AI)测试盒

产品规格:24样/48样

产品货号:YX-C-B930,YX-W-B930

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-B930

土壤酸性转化酶(S-AI)测试盒

可见分光光度法

50/24

550

YX-W-B930

土壤酸性转化酶(S-AI)测试盒

微量法

100/48

1000

土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒说明书
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-AI  pH  4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。

测定原理:

S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 AI 活性成正比。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1 4℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂 4℃ 保存;

试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存;

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称(μ L)

测定管

对照管

风干土样(g)

0.05

0.05

试剂一

 

400

试剂二

400

 

混匀, 37℃准确水浴 30min 95℃水浴 10min(盖紧,以防水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变)10000g 25℃离心 10min,取上清液

上清液

200

200

试剂三

100

100

混匀,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm 处,记录各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数), Δ A=A 测定-A 对照。

S-AI 活性计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001;x 为标准品浓度(μ  g/mL)为吸光值。单位的定义:每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-AI 活力单位。

S-AI 活力mg/d /g 土样[(Δ A +0.001) ÷0.0016×V 反总÷W÷T ÷1000=240×(Δ A+0.001)

反总:反应体系总体积:0.4mL;T:反应时间,1/48d; W:样本质量,0.05g;1mg=1000μ g。b. 96 孔板测定的计算公式如下


 

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0008x -0.001;x 为标准品浓度(μ  g/mL)为吸光值。单位的定义:每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-AI 活力单位。

S-AI 活力mg/d/g 土样[(Δ A +0.001) ÷0.0008×V 反总÷W÷T ÷1000=480×(Δ A+0.001)

反总:反应体系总体积:0.4mL;T:反应时间,1/48d; W:样本质量,0.05g;1mg=1000μ g。


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