产品名称:土壤淀粉酶测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-B929,YX-C-B929
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-B929 |
土壤淀粉酶测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
450 |
YX-W-B929 |
土壤淀粉酶测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
880 |
土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)试剂盒说明书(微量法)
注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。
测定原理:
淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与 3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在 508nm 处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。
自备实验用品及仪器:
天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 8mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
测定操作表:
|
对照管 |
测定管 |
土样(g) |
0.02 |
0.02 |
甲苯(μ L) |
10 |
10 |
25℃静置 15min |
||
试剂一(μ L) |
110 |
50 |
试剂二(μ L) |
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60 |
充分混匀,37℃震荡 1h,8000rpm,25℃,离心 10min |
||
上清液(μ L) |
100 |
100 |
试剂三(μ L) |
100 |
100 |
充分混匀,90℃水浴 5min,待冷却后,于微量石英比色皿/96 孔板中测定 508nm 吸光值,分别记为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。 |
计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.2525x - 0.034,R² = 0.9917
酶活单位定义:每g 土样每天催化生成 1mg 还原糖为一个酶活力单位。S-AL(mg/d /g 鲜重)=(△A +0.034)÷ 0.2525×V 反总÷W÷T
= 10.464×(△A +0.034)÷W
V 反总:反应体系总体积,0.11mL;T:反应时间,1/24d;W:样本质量,g。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.1263x - 0.034,R² = 0.9917
酶活单位定义:每g 土样每天催化生成 1mg 还原糖为一个酶活力单位。S-AL(mg/d/g)=(△A +0.034)÷ 0.1263×V 反总÷W÷T
=20.928×(△A +0.034)÷W
V 反总:反应体系总体积,0.11mL;T:反应时间,1/24d; W:样本质量,g。
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