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产品名称:土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒

产品规格:100管/48样,50管/24样

产品货号:YX-W-SNAG,YX-C-SNAG

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-SNAG

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒

可见分光光度法

50/24

650

YX-W-SNAG

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒

微量法

100管/48

1200

土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒说明书(可见分光光度法

注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容:

试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入3mL 丙酮溶解,用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂三:液体60mL×1瓶,4℃保存;

标准品:液体1mL×1支,5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,4℃保存。临用前用试剂一将标准品稀释50倍得100µmol/L 的标准溶液。

产品说明:

     土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。

      S-NAG分解对硝基苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

自备实验用品及仪器:

      可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛(或更小)和蒸馏水。

操作步骤:
一、样本处理:
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。

二、测定步骤:
1.分光光度计预热30min,波长调至400nm,蒸馏水调零。
2.加样表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

风干土样(g

0.1

0.1

-

-

试剂一(µL

550

550

-

-

试剂二(µL

50

-

-

-

混匀, 37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min盖紧,

防止水分散失,流水/冰浴冷却。

-

-

试剂二(µL

-

50

-

-

12000g 25℃离心10min,取上清液

-

-

上清液(µL

500

500

-

-

标准品(µL

-

-

500

-

蒸馏水(µL

-

-

 

500

试剂三(µL

1000

1000

1000

1000

室温静置2min 后,10000g 常温离心5min,取上清测定400nm处的吸光值A。分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算∆A=A 测定管-A 对照管,∆A标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-NAG 活力计算:

单位的定义:每天每g土样中产生1 µmol 对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力(U/g 土样)=∆A÷ (∆A标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =1.44× ∆A÷ ∆A标准÷W。

T:反应时间,1h=1/24d;V 反总:反应体系总体积:6×10-4 L;C标准:标准溶液浓度,100µmol/L W:样本质量,g。注意事项:

当∆A 大于 1 时,建议将上清液稀释后进行测定;当∆A 小于 0.02 时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。

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