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产品名称:土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒

产品规格:100管/48样,50管/24样

产品货号:YX-W-SLAP,YX-W-SLAP

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-SLAP

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒

可见分光光度法

50/24

750

YX-W-SLAP

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒

微量法

100管/48

1400

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性试剂盒说明书(可见分光光度法

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容:

试剂一:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;

产品说明:

S-LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

S-LAP测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。

2、在试剂二瓶中加入 30mL 试剂一充分溶解(如较难溶解,可 60℃水浴加热约 30min 促进溶解);在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

3、操作表

试剂名称

对照管

测定管

新鲜土样(g)

0.2

0.2

试剂一(μL)

1200

 

试剂二(μL)

 

1200

混匀, 37℃振荡反应 1h 后,8000g 4℃离心 10min,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 处测定吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管

S-LAP 活力单位的计算:

单位的定义:每天每 g 土样每天生成 1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

S-LAP(μmol/d /g 土样)=ΔA×V 反总÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA

V 反总:反应体系总体积,1.2×10-3 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm; d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d; W:样本质量,0.2g。

注意事项:

∆A 大于 1 时,建议将上清液稀释后进行测定;当∆A 小于 0.01 时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。


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