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产品名称:甘油三酯(TG)检测试剂盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:YX-C-B408,YX-W-B408

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-B408

甘油三酯(TG)测试盒

可见分光光度法

50管/48样

450

YX-W-B408

甘油三酯(TG)测试盒

微量法

100管/96样

850

甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书微量法

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

测定原理:

用异丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在420nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水

试剂组成和配置:

试剂一:液体×2 瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体×1 瓶,4℃ 避光保存。

试剂五:液体×1 瓶,4℃ 避光保存。

试剂六:液体×1 瓶,4℃ 避光保存。

标准品:液体×1 支,1mg/mL 标准甘油三酯溶液,4℃保存。

TG  的提取:

1、组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

2、细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清,即TG待测液。

3、血清(浆)样品:直接测定。

测定操作:

1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到420nm,蒸馏水调零。

2.水浴锅预热到 65℃。

 

空白管

标准管

测定管

双蒸水(μl)

10

/

/

1mg/ml标准液(μl)

/

10

/

TG待测液(μl)

/

/

10

试剂一(μl)

125

125

125

试剂二(μl)

25

25

25

加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡30s,静置,待分层后取上层溶液15μL,置于新的Ep管。

3.甘油三酯含量测定:

 

空白管

标准管

测定管

上层溶液(μl)

15

15

15

试剂三(μl)

50

50

50

试剂四(μl)

15

15

15

充分混匀,65℃水浴3min

试剂五(μl)

50

50

50

试剂六(μl)

50

50

50

充分混匀,65℃水浴15min

待冷却后,置于微量石英比色皿/96 孔板测定420nm处吸光值,记为A空,A标和A测。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

TG 含量(mg/dL)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)×100 mL

=100×(A测-A空)÷(A标-A空)

C 标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL=100 mL。

2. 组织中甘油三酯含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TG 含量(mg/ mg prot)= C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷Cpr

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷ Cpr

(2)按样本质量计算

TG 含量(mg/ g)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷W

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷ W

C 标准品:1mg/mL ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量计算:

TG含量(mg/104cell)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞(104cell/L)

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞(104cell/L)

C 标准品:1mg/mL。

b.使用 96 孔板测定的计算公式如下

1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

TG 含量(mg/dL)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)×100 mL

=100×(A测-A空)÷(A标-A空)

C 标准品:1mg/mL;100mL:血清体积,1dL=100 mL。

2. 组织中甘油三酯含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TG 含量(mg/mg prot)= C 标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷Cpr

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷ Cpr

(2)按样本质量计算

TG 含量(mg/g)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷W

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷ W

 

C 标准品:1mg/mL ;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g/mL

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量计算:

TG 含量(mg/104cell)=C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞(104cell/L)

=(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞(104cell/L)

C 标准品:1mg/mL。

注意事项:

1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. 加试剂二后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取。

3. 最低检出限为 100μmol/L


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