血锌浓度检测试剂盒说明书（微量法）

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

规格：100管/96样

测定意义：

锌是必需的微量元素之一，在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。

测定原理：

在 pH 8.5~9.5的溶液中，Zn²⁺与锌试剂生成蓝色配位化合物，在620nm有最大吸收峰。

自备仪器和用品：

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水和无水乙醇。

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。 临用前1天配制，加入10mL无水乙醇充分溶解，盖紧，过夜待用。4 ℃保存可稳定约1个月，如颜色变黄，则已失效。

标准液：液体×1 支，10μmol/L Zn²⁺标准液。4℃保存。

测定操作：

1.  分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到620nm，蒸馏水调零。

2.  标准液解冻：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。

3.  空白管：取1.5 mL EP管，依次加入100μL蒸馏水，200μL试剂一，混匀；室温，8000g，离心10min，小心吸取上清液100μL，加入0.5mL EP管，加入100μL试剂二，100μL试剂三，充分混匀后25℃静置10min，吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板，620nm测定吸光度，记为A 空白管。

4.  标准管：取1.5 mL EP管，依次加入100μL标准液，200μL试剂一，混匀；室温，8000g，离心10min，小心吸取上清液100μL，加入0.5mL EP管，加入100μL试剂二，100μL试剂三，充分混匀后 25℃静置10min，吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板，620nm测定吸光度，记为 A标准管。

5.  测定管：取1.5 mL EP管，依次加入100μL血清，200μL试剂一，混匀；室温，8000g，离心10min，小心吸取上清液100μL，加入0.5mL EP管，加入100μL试剂二，100μL试剂三，充分混匀后25℃静置 10min，吸取200μL于微量石英比色皿/96孔板，620nm测定吸光度，记为A测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

血锌浓度计算公式 ：

血锌浓度（μmol/dL）=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V 总

= 1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)

C 标准液：10μmol/L Zn²⁺；V 样总：血清总体积，1dL=0.1L。

注意事项：

1.  试剂三需提前一天配制，如变黄色则不能再使用。

2.  加入试剂三混匀后，要在30min内完成该管测定。

3.  最低检出限为1μmol/L。