产品名称：土壤中性蛋白酶测试盒
产品规格：24样/48样
产品货号：YX-C-B908,YX-C-B908
产品报价：
免费咨询：0551-66107970
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价（元） |
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YX-C-B908 |
土壤中性蛋白酶测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
680 |
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YX-W-B908 |
土壤中性蛋白酶测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1200 |
测定意义：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化， 其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT 在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理：
中性条件下，S-NPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96 孔板、双蒸水
试剂组成和配置：
试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 5ml 蒸馏水充分溶解；用不完的试剂 4℃保存； 试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 50μ L 试剂七使粉剂润湿，然后加入 10ml 试
剂一，转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 20ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂五：液体 3mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液，4℃避光保存； 试剂七：液体 1.5mL×1 支，4℃保存；
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定操作：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。
2、试剂二、三和四 40℃水浴 10min。
3、样本测定：
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试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
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风干土样（g） |
0.01 |
0.01 |
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试剂一（μ L） |
50 |
150 |
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试剂三（μ L） |
100 |
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混匀后，40℃水浴 30min，振荡 5-6 次，使土样与反应液充分接触
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试剂二（μ L） |
50 |
50 |
混匀，8000g 25℃离心 10min，取上清液，在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂
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测定管 |
对照管 |
标准管 |
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上清液（μ L） |
30 |
30 |
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试剂六（μ L） |
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30 |
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试剂四（μ L） |
140 |
140 |
140 |
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试剂五（μ L） |
30 |
30 |
30 |
混匀，40℃水浴 20min，680nm 下读取各管吸光值A
注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-NPT 活性计算：
单位定义：每天每g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-NPT 活力单位。
S-NPT(mg/d/g)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=48×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.2mL；T：反应时间，30min=1/48d； W：样本质量，0.01g。
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