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产品名称:土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒

产品规格:24样/48样

产品货号:YX-C-B939,YX-W-B939

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-B939

土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒

可见分光光度法

50/24

500

YX-W-B939

土壤蔗糖酶(S-SC)测试盒

微量法

100/48

880


土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)试剂盒说明书

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

测定原理:

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与S-SC 活性成正比。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯 1mL×1 4℃保存;(自备)试剂二:液体 7.5mL×1 4℃保存;

试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 22mL 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试 4℃保存;

试剂四:液体 22mL×1 瓶,4℃避光保存。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.03

0.03

试剂一(μ L)

5

5

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴 15min

试剂二(μ

L)

75

75

试剂三(μ

L)

220

 

蒸馏水(μ

L)

 

220

充分混匀,放入 37℃水浴培养 24 小时,10000 g,4℃,离心 5min,取上清液

上清液(μ L)

85

85

试剂四(μ L)

215

215

充分混匀,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释 10 (可以吸 100μ  L,加入 900μ  L 蒸馏水稀释;若吸光度大于 4,可以加大稀释倍数),取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔板中 510nm 处读吸光值 A。计算 Δ A=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-SC 活性计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062;x 为标准品浓度(mg/mL)为吸光值。单位的定义:每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。

S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( Δ A+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.4×(Δ A+0.062)

10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样本质量,0.03g。b.用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 2.45x -0.062;x 为标准品浓度(mg/mL)为吸光值。单位的定义:每天每g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个S-SC 活力单位。

S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( Δ A+0.062) ÷2.45×10×V 反总÷W÷T =40.8×(Δ A+0.062)

10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样品质量,0.03g。

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