土壤全硼试剂盒说明书（微量法） 

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

硼是植物生长发育必需的七种微量营养元素之一，土壤中硼素的含量高低直接影响着植物的生长状况。

测定原理：

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、马弗炉、微量石英比色皿/96 孔板。

试剂组成和配制：

提取剂：粉剂×1 瓶，4℃保存。

提取液：液体 100mL×4 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加 8mL 水溶解，加 0.125mL 乙酸。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 4mL 蒸馏水溶解。

样本处理：

新鲜土样风干，过 100 目筛，按照土壤质量（g）：提取剂质量(g)为 1：4 的比例（建议称取约 0.1g 土样，加入 0.4g 提取剂）缓慢加入提取剂于坩埚中，边加边搅拌均匀，然后在马弗炉中 550℃熔融 10min，然后在 920℃熔融 30min，趁热取出坩埚，将熔融物转入烧杯，边搅拌边加 4mL 提取液，必要时加盖，防止溶液溅出，溶解 30min 后，5000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作表：

计算公式：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995

全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

= 51.32×（△A+0.2359）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，4mL，W：样本质量，g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 0.1949x - 0.2359，R² = 0.9995

全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.1949×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

=102.64×（△A+0.2359）÷W

V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，4mL，W：样本质量，g

注意事项：

1. 配制好的试剂二 4℃保存不可超过 7 天。

2. 显色时严格控制温度并且避光，以免显色剂见光分解。