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产品名称:甜菜碱检测试剂盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:YX-C-C103,YX-W-C103

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-C103

甜菜碱测试盒

可见分光光度法

50/48

420

YX-W-C103

甜菜碱测试盒

微量法

100/96

800

甜菜碱含量检测试剂盒说明书(微量法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号: YX-W-C103
规格: 100T/96S
产品内容:
提取液:80%甲醇,自备。取 80mL 甲醇,加 20mL 蒸馏。
试剂一:粉剂 0.4g×4 瓶,4℃保存,临用前根据用量配制,每瓶加 15mL 蒸馏水,用浓盐酸调pH 为 1,搅拌 45min,过滤后用水定容至 20mL。
试剂二:乙醚,自备。
试剂三:液体 40mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:粉剂×1 瓶,常温保存。
标准品:粉剂×1 支,4℃保存。临用前加入 1mL 蒸馏水,即得 10mg/mL 甜菜碱标准液。
产品说明:
甜菜碱是一种广泛分布于动植物及微生物体内的季铵型水溶性生物碱,是生物体内胆碱的氧化产物,可以增强免疫力、降血脂、抗氧化、抗肿瘤,并可作为甲基供体,参与促进动物蛋白质和脂肪代谢、增进食欲、缓和应激、调节渗透压、稳定维生素等多种生物作用,在化工、医药、食品添加剂等领域有较广泛的应用。
甜菜碱在强酸条件下和雷氏盐发生反应产生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成红色溶液,在 525nm 处有特征吸收峰,测定 525nm 处的吸光值,可得样品的甜菜碱含量。
试验中所需的仪器和试剂:
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、甲醇、乙醚、盐酸、蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
取烘干后过 40 目筛的样品约 0.2g,加 1mL 提取液,置于 60℃提取 30min,期间不断震荡。用镊子加入约 3mg 试剂四后充分震荡,10000rpm,25℃,离心 15min,取上清液,于 70℃挥发甲醇(大约剩余 0.2mL,务必将甲醇挥发干净),之后用水定容至 1mL。
二、测定步骤:
1、 可见分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 525nm,试剂三调零。
2、 将 10mg/mL 甜菜碱标准液依次稀释为 9、8、7、6、5、4、3、2 mg/mL 的标准溶液备用。
3、 操作表:

试剂名称(mL

测定管

标准管

空白管

样本

0.03

-

-

标准品

-

0.03

-

蒸馏水

-

-

0.03

试剂一

0.3

0.3

0.3

充分混匀,4℃中反应 2h8000rpm25℃,离心 15min,弃上清

试剂二

0.3

0.3

0.3

8000rpm25℃,离心 10min,弃上清。置于通风橱使试剂二自然挥发干净

试剂三

0.3

0.3

0.3

震荡使沉淀充分溶解,吸取 0.2mL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中测定 A 准管、A 测定管和 A 空白管,计算ΔA 标准=A 标准管-A 空白管, ΔA 测定=A 测定管-A 空白管。

三、甜菜碱含量计算公式
1、绘制标准曲线:
以ΔA 标准为 y 轴,标准溶液浓度为 x 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将ΔA 测定带入方程,得到 x(mg/mL)
2、甜菜碱含量的计算:
甜菜碱含量(mg/g)=x×V 提取÷W。
V 提取:提取液体积,1mL;W:样本烘干质量,g。
注意事项:
1、试剂一配制时 pH 严格控制为 1,否则会导致反应不完全,配制后 4℃只能稳定 48 小时,配制后尽快使用。
2、试剂二与试剂三对呼吸道有一定的刺激,请做好防护工作。
3、使ΔA 的范围在标曲范围内。
4、本试剂盒检测范围在:2mg/ml-9mg/ml 之间。


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