注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。

测定原理：

巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在 412nm 处有最大吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和甲醇。

试剂组成和配制：

提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 1 mL×1 管，4℃避光保存。

样品的制备：
1. 动物、植物组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后加入 4mL 甲醇，室温震荡 10min，然后 10000g， 4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min） 然后 10000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
3. 血清、培养液：取 0.1mL，加 0.4mL 甲醇，室温震荡 10min，然后 10000g，4℃离心 10min， 取上清置冰上待测。