铜蓝蛋白测试盒说明书（微量法）

注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白，有运输铜的功能，同时具有氧化酶的活性，是细胞外液重要的抗氧化剂。

测定原理:

铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物，在645nm处有特征吸收峰，依此可得铜蓝蛋白活性。

自备实验用品及仪器:

天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 7mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。（使用前 37℃预热）

测定操作表:

1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至645nm，蒸馏水调零。

2、操作表

计算公式:

酶活定义:37℃条件下，每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高0.01为一个酶活单位。

Cp 活力（U/mL）=ΔA×V 反总÷0.01÷V 样÷T = 33.33×ΔA

V 样：0.03 mL；V 反总：0.3 mL；T：反应时间，30min

注意事项:

试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性，请操作时做好防护措施。