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产品名称：尿素氮(BUN)含量测试盒

产品规格：50管/24样，100管/48样

产品货号：YX-C-A812，YX-W-A812

产品报价：

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货号	产品名称	检测方法	规格	售价（元）
YX-C-A812	尿素氮测试盒	可见分光光度法	50管/24样	150
YX-W-A812	尿素氮测试盒	微量法	100管/48样	200

尿素氮（BUN）含量检测试剂盒说明(微量法)
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：YX-W-A812
规格：100T/48S
产品内容：
试剂一：粉剂×2瓶，4℃避光保存，临用前加2mL蒸馏水充分溶解。试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂三A 液：液体 0.4mL×1 支，4℃保存；
试剂三B 液：液体1.6mL×1 瓶，4℃保存；临用前将A 液倒入B 液中混合，或者根据比例（A:B=1:4）现用现配；
试剂四：液体 2mL×1 瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1 瓶，4℃保存。10mg 尿素。临用前加入 4.66mL 蒸馏水配制成 1mg/mL 尿素氮标准液。
产品说明：
尿素（BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤：一、样品处理
1. 组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5-10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），冰上匀浆后于4℃，13000g 离心15min，取上清待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1 的比例（建议500万个细胞加入1mL 蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3 s，间隔7 s，总时间3min）；然后4℃，13000g 离心15min，取上清置于冰上待测。
3. 血清（浆）或其它液体：直接检测。二、测定操作：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min，波长调至 630nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、将 1mg/mL 尿素氮标准液用蒸馏水稀释至 50μg/mL 备用。
3、加样表：

试剂名称（μL）	空白管	标准管	测定管	对照管
样品			12	12
标准品		12		-
蒸馏水	12			24
试剂一	24	24	24	-
试剂二	44	44	44	44
充分混匀，于 37℃反应 10min，
试剂三	16	16	16	16
试剂四	12	12	12	12
混匀，室温静止 30min。
蒸馏水	92	92	92	92
充分混匀后测定 630nm 处吸光值，记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管和 A 对照管。计算 ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 对照管。

三、计算公式：
1. 按样本质量计算：
尿素氮含量（μg/g）= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷W。
2. 按蛋白浓度计算：
尿素氮含量（μg/mg prot）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷（Cpr×V提取）
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。
3. 按细胞数计算：
尿素氮含量（μg/104 cell）= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量
=50×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量。
4. 按液体体积计算：
尿素氮含量（mg/mL）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品
=50×ΔA测定÷ΔA标准。
C标准品：标准品浓度，50μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：样品蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以万计。
注意事项：
1. 配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
2. ΔA测定大于1或者A测定管大于1时，建议将样品用蒸馏水稀释后在进行测定。

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