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中性蛋白酶活性检测试剂盒规范操作

中性蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的,属于一种内切酶,可用于各种蛋白质水解处理。在一定温度、PH值下,本品能将大分子蛋白质水解为氨基酸等产物。可广泛应用于动植物蛋白的水解,制取生产高级调味品和食品营养强化剂的HAP和HVP,此外还可用于皮革脱毛、软化、羊毛丝绸脱胶等加工。

 

产品说明:

NP 在一定的温度和中性 pH 条件下,催化水解蛋白质。由于其安全无毒、水解能力强、作用范

围广等特点,中性蛋白酶常用于食品、饲料、化妆品和营养保健品生产。

中性条件下,NP 催化酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成

钨蓝;在 680nm 有特征吸收峰

 

产品内容:

提取液:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加 10 mL 蒸馏水溶解。

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 10 mL 提取液,沸水浴中磁力搅拌溶解。

试剂三:液体 50mL×1 瓶, 4℃保存。

试剂四:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。

标准品:液体 1mL×1 支,0.25 μ mol/mL 标准酪氨酸溶液,4℃保存。

 

操作步骤:

一、粗酶液提取:

称约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃离心 10min,取上清,即粗酶

液,置冰上待测。或直接称取 0.1g 酶制品,加入 1mL 提取液,置冰上待测。

二、测定:

1.分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 680 nm,蒸馏水调零。

2.试剂一、试剂二和试剂三置于 30℃水浴保温 30min 以上。 

 

注意:若反应较弱,(测定管-对照管)差值较小,可适当延长反应时间(20-30min),即第一步水浴时间,最后计算酶活时对公式进行修改。

 

使用范围:

● 动植物蛋白水解粉(HAP、HVP)生产的应用
利用中性蛋白酶的酶促反应,可把动植物的大分子蛋白质水解成小分子肽或氨基酸,以利于蛋白质的有效吸收和利用,其水解液AN%高,水解度高,风味佳,已广泛用于生产高级调味品和食品营养强化剂,各种动物来源性抽提物生产功能性骨、肉提取物(骨素)、水产提取物、蛋白胨、肽等及研究开发一些高附加值的功能食品。
● 焙烤行业的应用:
中性蛋白酶可将面团的蛋白质水解成胨、肽类甚至氨基酸,从而减弱面团筋力,使它具有良好的可塑性和延伸性,保持清晰美观的印花图案。改善成品的光泽、使饼干断面层次分明,结构均匀一致,口感松爽酥脆。
● 大豆分离蛋白的应用:
能水解大豆分离蛋白成小分子肽,大大提高了大豆分离蛋白的生物效价,使其易为人体消化吸收,同时还提高了溶解,降低了粘度,改善了大豆分离蛋白的功能特性。
● 酵母抽提物、酵母浸膏的生产应用
提高最终产品的蛋白质利用率及风味

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