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产品名称:土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒

产品规格:100管/48样,50管/24样

产品货号:SBXYS-1-Y,SBXYS-2-Y

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

SBXYS-2-Y

土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒

可见分光光度法

50/24

900

SBXYS-1-Y

土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒

微量法

100管/48

1700

土壤 β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒说明书分光光度法 

注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解

的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理

S-β-XYS 催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在 405nm 处有特征吸收

峰,测定 405nm 光吸收增加速率,可计算 S-β-XYS 活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:液体 20mL×1  瓶,4℃保存。试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。粗酶液提取:

约 0.1g 鲜土或风干土样,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,然后 10000g, 4℃,离心 10min,取上清待测。

测定操作表:

1 分光光度计预热 30min,调节波长至 405nm。

2、操作表

 

对照管

测定管

样本(μL

200

200

试剂一(μL

 

50

试剂二(μL

400

350

混匀,45℃水浴 20min

试剂三(μL

400

400

混匀,静置 5min405nm 处测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一

个对照管。

β-木糖苷酶活性

标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值ΔA。酶活定义:每克土样每天催化产生 1μmol 对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T

=16.33×(ΔA-0.0011)÷W

V 样总:加入提取液体积,1mL V 反总:反应总体积,0.6mL;V 样:反应中样品体积,

0.2mL W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;

 

ΔA 控制在0.01-2 范围内,若ΔA 大于2,可适当减小样本量。标准曲线线性范围为:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL


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